ELISA, matrizes de anticorpos e tecnologias multiplex baseadas em esferas

Abaixo encontra mais informações sobre estes três métodos de imunoensaio que a Quimigen oferece

No domínio da investigação biomédica e do diagnóstico, são utilizadas várias tecnologias para detetar e quantificar proteínas de interesse. ELISA, matrizes de anticorpos e ensaios multiplex baseados em esferas são três métodos comummente utilizados que oferecem vantagens e limitações específicas. O objetivo deste artigo é apresentar uma comparação concisa destas tecnologias, destacando as suas principais características e aplicações.

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ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay):

O ELISA é uma técnica de imunoensaio amplamente utilizada, conhecida pela sua sensibilidade e especificidade. Envolve a imobilização de uma proteína ou antigénio alvo numa superfície sólida, como uma microplaca, seguida de uma série de reacções baseadas em anticorpos. O ELISA fornece dados quantitativos através da medição da alteração de cor gerada por uma reação enzimática.

Vantagens

Aplicações

Elevada sensibilidade e especificidade.
Protocolos amplamente estabelecidos e validados.
Económica e relativamente simples de executar.
Adequado para analisar um único analito num grande número de amostras.
Ideal para a deteção de proteínas de baixa abundância.

Diagnóstico clínico, incluindo doenças infecciosas e doenças auto-imunes.
Descoberta e validação de biomarcadores.
Monitorização dos níveis de expressão de proteínas em estudos de investigação.
Desenvolvimento de medicamentos e monitorização terapêutica.

Matrizes de anticorpos:

As matrizes de anticorpos, também conhecidas como matrizes de proteínas, permitem a deteção e quantificação paralelas de múltiplas proteínas numa única experiência. Estas matrizes consistem em anticorpos de captura imobilizados que se ligam especificamente a proteínas alvo, seguidos da deteção de proteínas ligadas utilizando anticorpos de deteção marcados.

Vantagens	Aplicações
Análise simultânea de várias substâncias a analisar (multiplexagem). Requer volumes de amostra mais pequenos em comparação com a ELISA. Capacidade de elevado rendimento para o rastreio de um grande número de amostras. Potencial para a descoberta de novos biomarcadores e interacções proteína-proteína.	Perfil de proteínas e descoberta de biomarcadores. Análise comparativa dos níveis de expressão de proteínas em estados de doença. Mapeamento de vias e estudos de interação proteína-proteína. Caracterização da função das proteínas e das redes de sinalização.

Tecnologia multiplex com base em esferas:

A tecnologia multiplex baseada em esferas utiliza esferas codificadas por cores, cada uma revestida com um anticorpo de captura único, permitindo a deteção simultânea de várias substâncias a analisar. As esferas são então incubadas com a amostra e uma mistura de anticorpos de deteção marcados com fluorescência, permitindo a quantificação das concentrações de proteínas.

Vantagens	Aplicações
Elevada capacidade de multiplexagem, com a capacidade de analisar até centenas de analitos em simultâneo. Necessidade de pequenos volumes de amostra. Ampla gama dinâmica e sensibilidade. Plataformas automatizadas disponíveis, reduzindo a variabilidade do ensaio.	Perfil imunitário e análise de citocinas. Estudos de investigação genéticos e baseados em proteínas. Avaliação exaustiva das vias de sinalização e das respostas imunitárias. Aplicações de diagnóstico, incluindo doenças infecciosas e biomarcadores de cancro.

Cada tecnologia, ELISA, matrizes de anticorpos e ensaios Multiplex, oferece vantagens e limitações distintas.

ELISA proporciona uma elevada sensibilidade e especificidade, mas não tem capacidade de multiplexagem.
As matrizes de anticorpos permitem a análise simultânea de múltiplas proteínas, mas têm limitações em termos de sensibilidade e gama dinâmica.
A tecnologia Multiplex é excelente na multiplexagem de elevado rendimento, mas requer instrumentação especializada e otimização.